1.適用範圍:本檢驗方法適用於小葉菜類、包葉菜類、瓜果類、核果類、
柑桔類及雜糧類中依減列(imazalil; 1-[2-(2,4-dichlorophenyl)-2-
(2-propenyloxy)ethyl]-1H-imidazole)之檢驗。
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2.檢驗方法:高效液相層析法(high performance liquid chromatogra-
phy, HPLC)
2.1 裝置:
2.1.1 高效液相層析儀:
2.1.1.1 檢出器:具有 225nm波長之紫外光檢出器。
2.1.1.2 層析管:Inertsil ODS-3,5μm,內徑 4.6mm×15cm,或
同級品。
2.1.2 振盪器(Shaker)。
2.1.3 固相真空萃取槽(Solid phase extraction vacuum manifold
s )。
2.1.4 攪拌均質器(Blender):適用於有機溶媒者。
2.1.5 減壓濃縮質器(Rotary evaporator)。
2.2 試藥:醋酸乙酯及無水硫酸鈉採用殘量級,乙 及甲醇採用液相層
析級,磷酸、磷酸二氫鉀及磷酸氫二鉀採用化學試藥特級,依減列
對照用標準品。
2.3 器具及材料:
2.3.1 抽氣瓶:500 mL。
2.3.2 布赫納漏斗(Buchner funnel):直徑11cm。
2.3.3 濃縮瓶:250 mL。
2.3.4 Bond Elut PRS 固相萃取匣( Bond Elut PRS cartridge):
500 mg,3 mL,或同級品。
2.3.5 Bond Elut C18 固相萃取匣(Bond Elut C18 cartridge) :
500 mg,3 mL,或同級品。
2.3.6 濾膜:孔徑 0.45μm,nylon 材質。
2.4 磷酸二氫鉀溶液之調製:
稱取磷酸二氫鉀 1.36g,溶於水中使成1L,以磷酸調pH至 2.5。
2.5 移動相溶液之調製:
乙 與磷酸二氫鉀溶液以 35:65(v/v) 比例混勻後,以濾膜過濾
,取濾液作為移動相溶液。
2.6 標準溶液之配製:
取依滅列對照用標準品約50mg,精確稱定,以乙 溶解並定容至10
0 mL,作為標準原液,使用時再以移動相溶液稀釋,供作標準溶液
。
2.7 檢液之調製:
2.7.1 萃取:
2.7.1.1 小葉菜類、包葉菜類、瓜果類、核果類及柑桔類:
將檢體置於攪拌均質器均質後,取約 20g,精確稱定,加
入磷酸氫二鉀1.5g及醋酸乙酯30mL,振盪萃取10分鐘,倒
入附有濾紙且上鋪無水硫酸鈉 20g之布赫納漏斗內,抽氣
過濾入抽氣瓶中,殘渣再以醋酸乙酯20mL,同樣操作二次
,合併濾液。於40℃水浴減壓濃縮至約10mL,供淨化用。
2.7.1.2 雜糧類:
將檢體置於攪拌均質器均質後,取約 50g,精確稱定(若
為乾燥檢體,則以水潤濕,靜置半小時),加入磷酸氫二
鉀1.5g及醋酸乙酯60mL,以振盪萃取10分鐘,倒入附有濾
紙且上鋪無水硫酸納 20g之布赫納漏斗內,抽氣過濾入抽
氣瓶中,殘渣再以醋酸乙酯40mL,同樣操作二次,合併濾
液。於40℃水浴減壓濃縮至約10mL,供淨化用。
2.7.2 淨化:
Bond Elut C18 固相萃取匣以甲醇10mL及醋酸乙酯10mL潤濕活
化;Bond Elut PRS 固相萃取匣以水10mL及甲醇10mL潤濕活化
,串聯此二固相萃取匣(Bond Elut C18 固相萃取匣在上,Bo
nd Elut PRS 固相萃取匣在下)。取 2.7.1節供淨化用溶液以
1 mL/min流速注入串聯之固相萃取匣,以醋酸乙酯 5mL沖洗,
棄流出液。取下Bond Elut C18 固相萃取匣,再以甲醇10mL及
水10mL沖洗 Bond Elut PRS固相萃取匣,棄流出液,續以移動
相溶液10mL沖提,收集沖提液於10mL容量瓶中,以移動相溶液
定容,供作檢液。
2.8 鑑別試驗及含量測定:
精確量取檢液及標準溶液各 20μL,分別注入高效液相層析儀中,
參照下列條件進行液相層析,就檢液與標準溶液所得波峰之滯留時
間比較鑑別之,並依下列計算式求出檢體中依滅列之含量( ppm)
:
C×V
檢體中依滅列含量(ppm)=───
M
C:由標準曲線求得檢液中依滅列之濃度(μg/mL)
V:檢體經淨化後定容之體積(mL)
M:取樣分析檢體之重量(g)
高效液相層析測定條件:
層析管柱:Inertsil ODS-3, 5μm,內徑 4.6mm×15cm
紫外光檢出器:波長 225 nm
移動相溶液:依 2.5節所調製之溶液
移動相流速:1.0 mL/min
備註:1.本檢驗方法之最低檢出限量為 0.03ppm。
2.食品中若有影響檢驗結果之物質,應自行探討。
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