1.適用範圍:本檢驗方法適用於食品中過氧化氫之檢驗。
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2.檢驗方法:
2.1 裝置:
2.1.1 分光光度計:具可見波長 490nm。
2.1.2 攪拌均質器(Blender)
2.2 試藥:鄰-二胺基苯二氯化氫(o-phenylenediamine dihydrochl-
oride,OPS) 、檸檬酸、檸檬酸三鈉、高錳酸鉀、硫酸及過氧化氫
(含量30%)均採試藥特級,過氧化(peroxides ,每mg之活性
約40單位)。
2.3 器具及材料:
2.3.1 容量瓶:1000mL,250mL ,100mL ,50mL。
2.3.2 三角燒瓶:250mL 。
2.3.3 共栓試管:20mL。
2.3.4 濾紙:Toyo No.5A或同級品。
2.4 試劑之調製:
2.4.1 0.1M檸檬酸溶液
稱取檸檬酸21.01g,以水溶解並定容至1000mL。
2.4.2 0.1M檸檬酸三鈉溶液
稱取檸檬酸三鈉29.41g,以水溶解並定容至1000mL。
2.4.3 0.1M檸檬酸監緩衝液(pH5.0)
取0.1m檸檬酸溶液35mL加0.1m檸檬酸三鈉溶液65mL
2.4.4 0.1 %鄰-二胺基苯溶液
取OPD100mg及過氧化10mg溶於檸檬酸鹽緩衝液(pH5.0)100
mL,臨用時調製
註:OPD 遇空氣會分解使顏色變深,故臨用時調製。
2.5 標準溶液之配製:
取過氧化氫約1g,精確稱定,置於 250mL容量瓶中,加水定容。
精確量取此溶液25mL,加 5%硫酸10mL,以0.1N高錳酸鉀溶液滴定
。另以水同樣操作,作空白試驗。並依下式計算過氧化氫濃度 A(
%):
過氧化氫濃度 A(%)=1.7007×(V-V0)×F/W ×100
1.7007:每mL之0.1N過錳酸鉀溶液相當於1.7007mg之過氧化氫。
V :0.1N高錳酸鉀溶液滴定量(mL)。
V0:0.1N高錳酸鉀溶液空白試驗滴定量(mL)。
F :0.1N高錳酸鉀溶液之力價。
W :過氧化氫稱取量(mg)。
精確稱取過氧化氫 200/Ag於 100mL容量瓶中,加水定容,作為標
準原液(,20mg/mL),使用時再取此溶液10mL,以水稀釋至
100mL ,重覆稀釋共三次,供作過氧化氫標淬溶液(20ug/mL)必
須臨用時調製。
2.6 檢液之調製:
檢體細碎,混合均勻,取含過氧化氫 300ug以下之適量檢體,精確
稱定,置於攪拌均質器中,加入水約40mL,攪拌均質 3分鐘後,以
濾紙過濾,濾液再以水定容至50mL,供作檢液,必須臨用時配製。
2.7 標準曲線之製作:
分別精確量取過氧化氫標準溶液 0, 0.1, 0.5, 1.0, 1.5mL置
於共栓試管中,加水至 5mL(亦即濃度依序為 0, 0.4, 4.0及6.
0ug/mL ),加鄰-二胺基苯溶液 5mL,混合均勻,於室溫下放置
10分鐘,再加 10N硫酸 1mL,混合均勻,於 490nm測定吸光度,製
作標準曲線。
2.8 含量測定:
精確量取檢液 5mL於共栓試管中,以下步驟同 2.7節,於 490nm測
吸光度,並依標準曲線求出檢體中過氧化氫之含量( ppm)。另以
水 5mL同樣操作,作空白試驗。
C×50
檢體中過氧化氫含量(ppm) =───
M
C :由標準曲線求得檢液中過氧化氫之濃度(ug/mL)。
M :分析檢體之取樣重量(g)
備註:1.本檢驗方法之低檢出限量為 0.5ppm 。
2.食品中若有影響檢驗結果之物質,應自行探討。
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