一、方法概要
    水樣中酚類物質（ Total recoverable phenolics，亦稱總酚）先經
    酸化、加熱及蒸餾收集後，將蒸餾液引入自動連續式流動分析系統，
    其中酚類物質在鹼性條件及鐵氰化鉀存在時，與4-氨基安替吡啉（4-am
    ino antipyrine）生成紅色安替吡啉染料（註 1），於波長 505或520 
    nm量測其吸光值，並定量水樣中之總酚含量。

二、適用範圍
    本方法適用於地面水體、地下水、放流水及海水中酚類之檢測。因水
    中的酚類物質種類很多，無法使用酚類混合物作為標準品，故本方法
    係以酚為標準，測定水樣中可形成安替吡啉染料之酚類總濃度（註 2）
    。其適用濃度範圍2-500 μ g/L。

三、干擾
  （一）如氯氣等氧化劑（在酸性溶液中可氧化碘化鉀者）之干擾，採樣
        後，立即加入硫酸亞鐵銨（或硫酸亞鐵）以去除其干擾，如氧化
        劑未能去除，部份酚類將被氧化而導致分析結果為負偏差。
  （二）硫化物，如硫化氫、二氧化硫之干擾，可加入磷酸使水樣之pH＜
        4 ，稍微攪拌曝氣並加入硫酸銅以消除干擾。
  （三）油及焦油之干擾，可用氫氧化鈉調整水樣之pH值於12.0至12.5，
        然後以 50 mL氯仿萃取樣品中之油及焦油，棄去氯仿層，水樣中
        殘存之氯仿需於蒸餾前在水浴上加熱去除。
  （四）可於分析樣品與標準品前，使用 Kel-F管和玻璃管將試劑水以虹
        吸（Siphon）方式充滿清洗系統（ wash receptacle）以去除來
        自塑膠管及樣品容器的背景污染。

四、設備與材料
  （一）蒸餾裝置：加熱板（或加熱包），附有硼矽玻璃製之 1 L燒瓶及
        蛇形冷凝管。
  （二）流動分析系統之設備（註 3）包含下列各樣裝置：
        1.可使用氣泡分隔式（ Segmented Flow Analysis， SFA，如圖
          一）或流動注入式（ Flow Injection Analysis， FIA，如圖
          二）之流動分析進樣方式。
        2.多管式蠕動泵。
        3.分光光度計，具波長 505或520 nm之偵測器。
        4.數據擷取系統。
  （三）分析天平：可精稱至0.1 mg。
  （四）pH計。
  （五）薄膜濾紙，孔徑 0.45 μ m。
  （六）移液管：如5.0 mL、 10.0 mL、 20.0 mL、 30.0 mL、 40.0 mL
        、 50.0 mL。
  （七）定量瓶：如100.0 mL、250.0 mL、500.0 mL、 1.0 L等。

五、試劑
    所有檢測使用的試劑化合物除非另有說明，否則必須是分析試藥級以
    上之等級。若須使用其他等級試藥，在使用前必須要確認該試劑的純
    度足夠高，干擾物最少，使檢測結果的準確度不致降低。
  （一）試劑水：比電阻值≧16 MΩ- cm，可作為載流液並以其配製所有
        之試劑。
  （二）鐵氰化鉀緩衝溶液：溶解 1.0 g鐵氰化鉀，1.55 g硼酸和1.875 
        g 氯化鉀於400 mL試劑水中，以 1.0 N氫氧化鈉溶液調整試劑的
        pH值至10.3後，加入試劑水定量至500 mL。再加入 0.25 mL之聚
        氧乙烯月桂醚（ Brij-35，Polyoxyethylene lauryl ether，（
        C2H4O ）23C12H25OH，CAS NO 9002-92-0），此溶液應每週製備
        。
  （三）氫氧化鈉溶液（ 1 N）：溶解20 g氫氧化鈉於250 mL試劑水，冷
        卻後加入試劑水定量至500 mL。
  （四）氫氧化鈉溶液（ 1+9）：以試劑水稀釋 10.0 mL 1 N氫氧化鈉溶
        液定量至100 mL。
  （五）濃硫酸。
  （六）硫酸溶液（ 1+9）：緩慢將 10 mL濃硫酸加入於 70 mL試劑水，
        冷卻後加入試劑水定量至100 mL。
  （七）4-氨基安替??溶液：溶解0.13 g之4-氨基安替??（4-amino anti
        pyrine）於150 mL試劑水中，最後定加入試劑水定量至200 mL，
        此溶液應於使用當日配製。
  （八）酚儲備溶液：將0.50 g酚（phenol）以新鮮煮沸且已冷卻的試劑
        水溶解於500 mL量瓶中，定容至刻度； 1.0 mL=1.0 mg酚，此溶
        液應每月配製。（註 4）
  （九）酚工作溶液 A︰以新煮沸且已冷卻之試劑水稀釋1.0 mL酚儲備溶
        液定量至100 mL； 1.0 mL ＝ 10.0 μ g酚，此溶液應於使用當
        日配製。
  （十）酚工作液 B：以新煮沸且已冷卻之試劑水稀釋 10.0 mL酚工作溶
        液 A定量至100 mL；1.0 mL＝ 1.00 μ g酚，此溶液應在使用前
        二小時內配製。
  （十一）酚工作溶液 C：以新煮沸且已冷卻之試劑水稀釋 10.0 mL酚工
          作溶液 B定量至100 mL；1.0 mL＝ 0.10 μ g酚，此溶液應在
          使用前二小時內配製。
  （十二）硫酸亞鐵銨溶液：於 1000 mL之量瓶中，加入 1.1 g硫酸亞鐵
          銨，以新煮沸且已冷卻之試劑水500 mL及1 mL濃硫酸將其溶解
          後，再定量至刻度。
  （十三）磷酸。
  （十四）氯仿（ CHCl3）。

六、採樣與保存
    採集至少 1 L之水樣於可密封之棕色玻璃瓶內，採樣後 4小時內分析
    ；如不能在上述時間內分析，可以濃硫酸將樣品酸化，使其pH值小於
    2 ，並於暗處 4℃冷藏，如此可抑制酚類物質的生物性分解，樣品最
    長保存期限為28天。

七、步驟
  （一）水樣前處理
        1.量取500 mL或適量之水樣稀釋至500 mL置於燒杯中，以 1+9氫
          氧化鈉溶液或 1+9硫酸溶液調整pH至 4左右，然後將水樣移至
          蒸餾裝置加熱蒸餾（若樣品保存時已添加硫酸使其pH值小於 2
          ，則可免再調整pH值）。
        2.收集蒸餾液約至450 mL後，停止加熱，俟水樣不再沸騰時，再
          加入 50 mL熱試劑水於蒸餾瓶中，繼續加熱蒸餾至蒸餾液為近
          500 mL時，取出以試劑水定量至500 mL。若蒸餾液呈混濁，可
          以試劑水預洗過之薄膜濾紙過濾。
  （二）建立等同如圖一或圖二之流動分析設備（註 3）。首先將樣品（
        或標準品）注入一定體積於分析系統中，依設計目的混合、緩衝
        、反應、呈色，最後流經流穿式樣品槽（ Flow cell）而於 505
        或520 nm波長量測其吸光值，檢測定量。
  （三）儀器操作：依儀器製造廠商提供之操作說明文件，進行分析儀器
        之組裝、測試、校正和操作。
  （四）檢量線製備：
        1.視水樣濃度範圍，於儀器線性範圍內以酚工作溶液 A、 B或 C
          配製至少五種濃度（不含空白）之酚標準溶液。以檢量線標準
          溶液與儀器反應所得訊號，再與標準品中酚含量（mg phenol/
          L ）作圖，繪製檢量線。
        2.檢量線確認：完成檢量線製作後，須以第二來源標準品配製檢
          量線中點濃度附近之標準品進行檢量線確認。

八、結果處理
    由樣品溶液測得之吸光度，代入檢量線可求得溶液中酚類之濃度（mg
    /L），再依下式計算樣品中酚類之濃度。
    A ＝ A’  × F
    A ：樣品中酚類濃度（mg/L）。
    A’：由檢量線求得樣品溶液中酚類濃度（mg/L）。
    F ：稀釋倍數。

九、品質管制
  （一）檢量線：每次樣品分析前應重新製作檢量線，其線性相關係數應
        大於或等於 0.995。檢量線確認相對誤差值應在  ± 15%以內。
  （二）檢量線查核：每10個樣品或每批次分析結束時，執行一次檢量線
        查核，以檢量線中間濃度附近的標準溶液進行，其相對誤差值應
        在  ± 15%以內。
  （三）空白樣品分析：每10個樣品或每批次樣品至少執行一次空白樣品
        分析，空白分析值應小於二倍方法偵測極限。
  （四）重複樣品分析：每10個樣品或每批次樣品至少執行一次重複樣品
        分析，其相對差異百分比應在 15%以內。
  （五）查核樣品分析：每10個樣品或每批次樣品至少執行一次查核樣品
        分析，其回收率應在 85%至115%範圍內。
  （六）添加分析：每10個樣品或每批次樣品至少執行一次添加標準品分
        析，回收率應在 85%至115%範圍內。

十、精密度與準確度
    實驗室間以試劑水為基質檢測酚，其分析結果的精密度與準確度如表
    一所示。資料來源：參考資料（一）。

十一、參考資料
    （一）U.S. Environmental Protection Agency. Environmental Mo
          nitoring and Support Laboratory. Methods for Chemical 
          Analysis of Water and Wastewater, Method 420.4 Cincinn
          ati, Ohio. USA, 1993. 
    （二）行政院環境保護署，水中酚類檢測方法－比色法， NIEA W520
          ，2006。
    （三）行政院環境保護署，水中總酚檢測方法－分光光度計法，NIEA
           W521 ，2005。
    （四）U.S. Environmental Protection Agency. "Definition and 
          Procedure for the Determination of Method Detection Li
          mits." Appendix B to 40 CFR 136 rev. 1.11 amended June
           30,1986.49 CFR 43430, 1989.

註 1：本方法可測定鄰位、間位取代之酚類，在適當pH值下，亦可測定對
      位為羧基（carboxyl）、鹵素（ halogen）、甲氧基（methoxyl）
      及磺酸（ sulfonic acid）取代之酚類，但無法測定對位為烷基（
      alkyl）、芳香烴基（aryl）、苯甲醯基（ benzoyl）、硝基（nit
      ro）、亞硝基（ nitroso）或醛基（aldehyde）所取代之酚類。
註 2：本方法以酚為標準品，但各種酚類與4-氨基安替??反應所產生之顏
      色並不相同，通常被取代後之酚反應性降低，故所得之測值代表樣
      品中酚類物質的最低含量。
註 3：本方法之「流動分析系統之設備」僅為示意圖，其組裝或架構只要
      能符合本方法原理之連續式流動分析系統，進行儀器設定校正或操
      作，並以品管樣品及真實樣品進行操作條件之準確度與精密度驗證
      後，始得進行樣品之檢測。有關驗證文件需留存備查。
註 4：酚具有毒性，需非常小心使用。
註 5：廢液分類處理原則－本檢驗廢液依一般有機廢液處理。
註 6：本文引用之公告方法名稱及編碼，以環保署最新公告者為準。