1.適用範圍：本檢驗方法適用於禽畜肉、肉臟及其製品中氯黴素（chlor-
  amphenicol）之檢驗。

2.檢驗方法：高效液相層析法（high performance liquid chromatogra-
  phy,HPL(C)
  2.1 裝置：
    2.1.1 高效液相層析儀：
      2.1.1.1 檢出器：具有 278nm波長紫外光之檢出器。
      2.1.1.2 層析管： ODS， 5um，內徑 4.0mm×25cm。
    2.1.2 攪拌均質器（Blender）
    2.1.3 震盪器（Vortex mixer）
    2.1.4 減壓濃縮裝置（Rotary evaporator）。
    2.1.5 離心機（Centrifuge）。
    2.1.6 氮氣蒸發裝置（Nitrogen evaporator）。
    2.1.7 真空固相萃取裝置（Solid phase extraction vacuum manif-
          old ）。
  2.2 試藥：正己烷、乙酸乙酯採用殘留量級：甲醇、乙採用液相層析
      級；氯黴素對照標準品。
  2.3 器具及材料：
    2.3.1 離心瓶： 50mL 。
    2.3.2 濃縮瓶： 250mL。
    2.3.3 C18 過濾層析匣： 500mg。
    2.3.4 試管： 5mL、15mL。
    2.3.5 濾膜：孔徑 0.45um ， PVDF 材質。
  2.4 移動相溶液之調製：
    2.4.1 去離子水與乙以75：25（v/v） 之比例混合均勻後以濾膜過
          濾，取濾液作為禽肏肉檢體分析之移動相溶液。
    2.4.2 去離子水與乙以 82：18（v/v）之比例混合後均勻後以濾膜
          過濾，取濾液作為內臟檢體分析之移動相溶液。
  2.5 標準溶液之配製：
      稱取氯黴素對照標準品約 100mg，精確稱定，以甲醇溶解並定容至
      100mL 作為標準原液，臨用時再以去離子水稀釋成濃度為 0.05～1
      ug/mL 之標準溶液。
  2.6 檢液之調製：
    2.6.1 萃取：檢體細切，以均質機均質後，取檢體5g，精確稱定，置
          於50mL離心瓶中，加入乙酸乙酯30mL，震盪 1分鐘，再以3500
          rpm 離心 5分鐘，將上層液倒入 250mL，重複萃取步驟兩次，
          合併上層液，加入 4％氯化鈉水溶液 4mL，經減壓濃縮去除乙
          酸乙酯，殘留物移入50mL離心瓶中，另各以 4％氯化鈉水溶液
          2mL 溶洗濃縮瓶兩次並併入離心瓶，再分別以正己烷10mL洗濃
          縮瓶兩次並併入離心瓶，震盪30秒後以 2000rpm離心 3分鐘，
          棄上層液。禽畜肉檢體之下層液移入15mL試管中供淨化用；內
          藏檢體之下層液再以乙酸乙酯30mL萃取，震盪30秒後以2000rp
          m 離心 3分鐘，將上層液移入 250mL濃縮瓶，重複萃取步驟兩
          次，合併上層液，加入 4％氯化鈉水溶液 4mL，經減壓濃縮去
          除乙酸乙酯，殘留物移入15mL試管中，另各以 4％氯化鈉水溶
          液 2mL溶洗濃縮瓶兩次並併入試管中供淨化用。
    2.6.2 淨化：
          取 2.6.1節淨化用溶液，注入先以甲醇 3mL，再以去離子水3m
          L 潤洗之 C18過濾層析匣，調整真空固相萃取裝置流速至每秒
          一滴（每滴體積約0.04mL），棄流出液。禽畜肉檢體直接以60
          ％甲醇水溶液 3mL沖提；內藏檢體則依序再以去離子水 1mL及
          30％甲醇水溶液 3mL流洗，棄洗液，再以60％甲醇水溶液 3mL
          沖提，沖提液於45℃水浴氮氣濃縮並定容至 1mL供作檢液。
  2.7 鑑別試驗及含量測定：
      精確量取檢液及標準溶液各50uL，分別注入高效液相層析儀中，參
      照下列條件進行液相層析，就檢液與標準溶液所得波峰之滯留時間
      比較鑑別之，並另以標準溶液按上述方法作出檢量線，求出檢體中
      氯黴素之含量（ ppm）：
                               C×V
      檢體中氯黴素含量（ppm）：───
                                 M
      C ：由檢量線或波峰面積求得檢液中氯黴素之濃度（ug/mL）
      V ：檢體最後經淨化定容之體積（mL）
      M ：取樣分析檢體之重量（g）
      高效液相層析偵測條件：
      層析管柱：ODS ， 5um，內徑 4mm×25cm。
      紫外光檢出器：波長 278nm。
      移動相溶液：依 2.4  節所調製之溶液。
      移動相流速： 1.0mL/min。
      備註1.本檢驗方法最低檢出量為 0.01ppm。
          2.不同食品基質是否影響檢驗結果，應自行檢討。
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