1.適用範圍:本檢驗方法適用於瓜果類及乾豆類中六伏隆(hexaflumuron
;(3,5-dichloro-4-(1,1,2,2-tetrafluoroethoxy)phenyl)-3-(2,6-d-
ifluorobenzoyl)urea) 之檢驗。
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2.檢驗方法:高效液相層析法(high performance liquid chromatogra-
phy, HPLC)
2.1 裝置:
2.1.1 高效液相層析儀:
2.1.1.1 檢出器:具有 254nm波長之紫外光檢出器。
2.1.1.2 層析管:RP-Select B ,5μm,內徑4 mm×25cm,或同級
品。
2.1.2 攪拌均質器(Blender):適用於有機溶媒者。
2.1.3 振盪器(Shaker)。
2.1.4 減壓濃縮裝置(Rotary evaporator)。
2.2 試藥:丙酮、正己烷、乙醚、二氯甲烷、甲醇、乙 及乙醚採用殘
量級;氯化鈉及無水硫酸鈉採用化學試藥特級;六伏隆對照用標準
品。
2.3 器具及材料:
2.3.1 抽氣瓶:500 mL。
2.3.2 布赫納漏斗(Buchner funnel):直徑11cm。
2.3.3 分液漏斗:250 mL。
2.3.4 濃縮瓶:500 mL。
2.3.5 胺基固相萃取匣(Amino N cartridge for solid phase
extraction):500 mg,6 mL。
2.3.6 濾膜:孔徑 0.45μm,polyvinylidene difluoride 材質。
2.4 移動相溶液之調製:
乾豆類:乙 、水及甲醇以 45:35:20(v/v/v)之比例混合後,以
濾膜過濾,取濾液作為移動相溶液。
瓜果類:乙 與水以 60:40(v/v) 之比例混合後,以濾膜過濾,
取濾液作為移動相溶液。
2.5 標準溶液之配製:
取六伏隆對照用標準品約 100mg,精確稱定,以甲醇溶解並定容至
100 mL,作為標準原液,使用時再以甲醇稀釋,供作標準溶液。
2.6 檢液之調製:
2.6.1 萃取:
取切碎之瓜果類約 50g,精確稱定,加丙酮 100mL,均質一分
鐘;若為乾豆類,則取磨碎之檢體約 20g,精確稱定,加水20
mL,靜置十分鐘後,加丙酮 100mL,均質一分鐘,分別抽氣過
濾,並以丙酮洗容器及殘渣,合併濾液,於35℃水浴減壓濃縮
至無丙酮,移入分液漏斗,以正己烷30mL洗濃縮瓶,併入分液
漏斗中,加氯化鈉2g,振盪萃取一分鐘,靜置分層,收集正己
烷層,水層再加正己烷30mL,振盪萃取一分鐘,靜置分層,合
併收集兩次正己烷層,以無水硫酸鈉脫水,再以正己烷定容至
100 mL,供淨化用。
2.6.2 淨化:
取 2.6.1節之正己烷定容液20mL,注入先經正己烷15mL潤洗過
之胺基固相萃取匣,以正己烷20mL沖洗,續以正己烷:乙醚(
2:1,v/v) 溶液 5mL沖洗,棄流出液,最後以二氯甲烷 8mL沖
提,收集沖提液,以氮氣吹乾,再以甲醇溶解並定容至 1mL,
經濾膜過濾後,供作檢液。
2.7 鑑別試驗及含量測定:
精確量取檢液及標準溶液各 20μL,分別注入高效液相層析儀中,
參照下列條件進行液相層析,就檢液與標準溶液所得波峰之滯留時
間比較鑑別之,並依標準曲線求出檢體中六伏隆之含量( ppm):
5×C×V
檢體中六伏隆之含量(ppm)=─────
M
C:由標準曲線或波峰面積求得檢液中六伏隆之濃度(μg/mL)
V:檢體淨化後定容之體積(mL)
M:取樣分析檢體之重量(g)
高效液相層析測定條件:
層析管柱:RP-Select B ,5μm,內徑 4mm×25cm。
紫外光檢出器:波長 254nm。
移動相溶液:依 2.4節所調製之溶液。
移動相流速:1.0 mL/min。
備註:1.本檢驗方法之最低檢出限量乾豆類為 0.01ppm,瓜果類為0.05
ppm。
2.食品中若有影響檢驗結果之物質,應自行探討。
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